vpswindows另类极品,电影天堂为什么,人妻久久精品天天中文字幕,欧美久久

歡迎來到本生(天津)健康科技有限公司網(wǎng)站!
網(wǎng)站導(dǎo)航
技術(shù)文章
當(dāng)前位置:主頁(yè) > 技術(shù)文章 >ELISA實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn):ELISA檢測(cè)需做好那幾步

ELISA實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn):ELISA檢測(cè)需做好那幾步

更新時(shí)間:2023-12-11    點(diǎn)擊次數(shù):1019

  ELISA實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn):ELISA檢測(cè)需做好那幾步


  ELISA檢測(cè)系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研生產(chǎn)中最為廣泛最為靈敏的技術(shù)手段??墒窃谛吕鲜植僮鬟^程中總是會(huì)出現(xiàn)或大或小的問題,比如說花板,假陽(yáng)性,全顯色,全部顯色,顯色比空白還低.。

  1、包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別,所以保存抗原很重要,我做重組蛋白時(shí),師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。還有有的包被原可能不是蛋白,對(duì)于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對(duì)其改造再加以包被,方法簡(jiǎn)要的列出如下:

 ?、儆H和素生物素:先親和素先包被載體,加入生物素化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

 ?、谥愇镔|(zhì):可將其在有機(jī)溶劑(例如乙醇)中溶解后加入ELISA板孔中,開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干,待酒精揮發(fā)后,讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。

 ?、坌》肿颖仨氁揽亢痛蟮牡鞍纵d體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。

  2、包被液的選擇,一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液。但有時(shí)由于試驗(yàn)的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。應(yīng)注意以下原理:由于蛋白質(zhì)與聚苯乙/烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用,這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。具體的試驗(yàn)還要有堅(jiān)固的理論外也要實(shí)踐,看一下最終可不可以應(yīng)用到自己試驗(yàn)當(dāng)中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液,還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。

  3、封閉:繼包被之后用高濃度的無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙,從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。常用封閉劑有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明膠;脫脂奶粉,比較價(jià)廉,可以高濃度使用(5%-10%);還有一些稀有用到的各種動(dòng)物血清(主要為了排除相似蛋白干擾)和酪蛋白等等。但最終選用什么,要依據(jù)試驗(yàn)具體來實(shí)踐。

  4、洗滌板:可以說在ELISA操作中,洗滌是最主要的關(guān)鍵技術(shù)。因?yàn)榫郾揭?烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,為達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的,清除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性地吸附的干擾物質(zhì),在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。所以在洗板時(shí)會(huì)有一定誤差,人為因素很大(當(dāng)然有條件的用洗板機(jī)除外),洗的不或串了孔,對(duì)如此靈敏的ELISA系統(tǒng)可是不小的影響。

  5、加抗體標(biāo)本(和二抗):注意該換槍頭時(shí)換槍頭。標(biāo)本稀釋一般可用PBS稀釋,也可用封閉液去稀釋。如需加二抗,還要注意二抗的工作濃度,太高浪費(fèi),太低則著色淺。

  6、顯色:顯色系統(tǒng)又很多,我們一開始做的時(shí)候,要選擇適宜的顯色系統(tǒng)。注意顯色系統(tǒng)酶活性底物的保存HRP結(jié)合物加硫柳泵,AP結(jié)合物可加疊氮鈉。

  7、每次做盡量要把陰陽(yáng)空三個(gè)對(duì)照做好,如出現(xiàn)問題也好分析。

  ELISA本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來。

如果您有任何問題,請(qǐng)跟我們聯(lián)系!

聯(lián)系我們

版權(quán)所有©2024 本生(天津)健康科技有限公司 備案號(hào):津ICP備19006588號(hào)-2 sitemap.xml 技術(shù)支持:制藥網(wǎng) 管理登陸

地址:天津市武清開發(fā)區(qū)創(chuàng)業(yè)總部基地五號(hào)樓

在線咨詢 聯(lián)系方式 二維碼

服務(wù)熱線

15502280048

掃一掃,聯(lián)系我們

久久国产精品免费一区| 久久久久久亚洲精品成人| 中文毛片无遮挡高潮免费| 亚洲精品55夜色66夜色| 欧美综合精品| 国产第一av| 欧美精品久久久久久久| 被粗汉h玩松了尿进去| 色妞www精品免费视频| 亚洲国产高清aⅴ视频| 国产自无码视频在线观看| 日韩人妻少妇一区二区三区 | 欧洲裸体兽交大黑妞| 福利看片| 成人777| 国产精品老熟女视频一区二区| 久久人人97超碰caoporen| 久久精品娱乐亚洲领先| 久久亚洲精品日韩高清| 亚洲精品无码久久久| 中文字幕日本乱码仑区在线 | 亚洲欧美偷拍另类a∨色屁股| 公妇乱淫100集| 性色一区| 精品人妻中文字幕有码在线| 四虎在线国产精品| 无码专区天天躁天天躁在线| 国产91中文综合日韩免费| 蜜臀AV午夜一区二区三区| 午夜三级a三级三点在线观看 | av在线中文| 且末县| 欧美国产综合欧美视频| 国产内射爽爽大片视频社区在线| 久久亚洲中文无码咪咪爱 | 日韩欧美黄色| 国产乱国产乱老熟300部| 7777久久亚洲中文字幕蜜桃| 国产精品美女久久久久久| 天堂中文在线最新版www| 亚洲国产中文综合专区在|